Preview

Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии

Расширенный поиск

Определение FLAER-негативных гранулоцитов в периферической крови -простой скрининг-тест для диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии

https://doi.org/10.24287/1726-1708-2016-15-3-12-18

Полный текст:

Аннотация

Современным стандартом диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ) является определение ГФИ-дефицитных клеток многоцветной проточной цитометрией с использованием флуоресцентно-меченного аэролизина (FLAER). Однако в качестве скринингового теста при подозрении на ПНГ необходима разработка более простого теста, обладающего, тем не менее, высокой диагностической чувствительностью. Цель исследования - оценить возможность применения упрощенного двухцветного (FLAER/CD15) анализа в качестве скринингового исследования на наличие ПНГ-клона. FLAER-негативные гранулоциты определяли в 259 образцах периферической крови больных с подозрением на ПНГ. Результаты сравнивались с данными стандартного многоцветного исследования. Как в тестовой (n = 216), так и в валидационной (n = 43) когорте результаты определения FLAER-негативных гранулоцитов хорошо коррелировали с данными многоцветной цитометрии. При этом диагностическая чувствительность упрощенного метода в обеих когортах составила 100%, а количество ложноположительных результатов было крайне низким (2,3% в тестовой когорте и 0% в валидационной). Таким образом, двухцветное цитометрическое определение FLAER-негативных гранулоцитов является высокоэффективным скрининговым тестом на наличие ПНГ-клона. При этом положительный результат должен быть подтвержден дальнейшим комплексным иммунофенотипированием с определением размера ГФИ-дефицитной популяции среди эритроцитов, гранулоцитов и моноцитов.

Об авторах

Александр Михайлович Попов
Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева Минздрава России
Россия


Светлана Александровна Кашпор
Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева Минздрава России
Россия


Татьяна Юрьевна Вержбицкая
Областная детская клиническая больница №1, Екатеринбург
Россия


Вячеслав Игоревич Борисов
ООО «Алексион Фарма»
Россия


Лариса Геннадьевна Фечина
Областная детская клиническая больница №1, Екатеринбург
Россия


Светлана Александровна Плясунова
Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева Минздрава России
Россия


Алексей Александрович Масчан
Институт гематологии, иммунологии и клеточных технологий
Россия


Галина Анатольевна Новичкова
Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева Минздрава России
Россия


Список литературы

1. Parker CJ. The pathophysiology of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Exp Hemtol. 2007;35(4):523-33.

2. Richards SJ, Hill A, Hillmen P. Recent advances in the diagnosis, monitoring, and management of patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72(5):291-8.

3. Кулагин АД, Лисуков ИА, Птушкин ВВ, Шилова ЕР, Цветаева НВ, Михайлова ЕА. Национальные клинические рекомендации по диагностике и лечению пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Онкогематология. 2014;2:20-8.

4. Новичкова ГА, Петрова УН, Калинина ИИ, Масчан АА. Пароксизмальная ночная гемоглобинурия у детей (обзор литературы). Доктор.ру. 2016; 5(122):15-20.

5. Brodsky RA, Mukhina GL, Li S, Nelson KL, Chiurazzi PL, Buckley JT, et al. Improved detection and characterization of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria using fluorescent aerolysin. Am J Clin Pathol. 2000;114(3):459-66.

6. Peghini PE, Fehr J. Clinical evaluation of an aerolysin-based screening test for paroxysmal nocturnal haemoglobinuria. Cytometry B Clin Cytom. 2005; 67(1):13-8.

7. Sutherland DR, Kuek N, Davidson J, Barth D, Chang H, Yeo E, et al. Diagnosing PNH with FLAER and multiparameter flow cytometry. Cytometry B Clin Cytom. 2007;72(3):167-77.

8. Sutherland DR, Kuek N, Azcona-Olivera J, Anderson T, Acton E, Barth D, et al. Use of a FLAER-based WBC assay in the primary screening of PNH clones. Am J Clin Pathol. 2009;132(4):564-72.

9. Borowitz MJ, Craig FE, Digiuseppe JA, Illingworth AJ, Rosse W, Sutherland DR, et al. Guidelines for the diagnosis and monitoring of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria and related disorders by flow cytometry. Cytometry B Clin Cytom. 2010;78(4):211-30.

10. Sutherland DR, Illingworth A, Keeney M, Richards SJ. High-Sensitivity Detection of PNH Red Blood Cells, Red Cell Precursors, and White Blood Cells. Curr Protoc Cytom. 2015;72(6):1-29.

11. Плеханова ОС, Наумова ЕВ, Луговская СА, Почтарь МЕ, Бугров ИЮ, Долгов ВВ. Методологические подходы к диагностике пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Клиническая лабораторная диагностика. 2016;61(3):151-68.

12. Sutherland DR, Acton E, Keeney M, Davis BH, Illingworth A. Use of CD157 in FLAER-based assays for high-sensitivity PNH granulocyte and PNH monocyte detection. Cytometry B Clin Cytom. 2014;86(1):44-55.

13. Гальцева ИВ, Фидарова ЗТ, Борисов ВИ, Михайлова ЕА. Новые возможности диагностики клона пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Гематология и трансфузиология. 2015;60(2):6-9.

14. Hochsmann B, Rojewski M, Schrezenmeier H. Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH): higher sensitivity and validity in diagnosis and serial monitoring by flow cytometric analysis of reticulocytes. Ann Hematol. 2011;90(8): 887-99.

15. Наумова ЕВ, Плеханова ОС, Луговская СА, Почтарь МЕ, Бугров ИЮ. Оценка и сравнительная характеристика определения ПНГ-клона на ретикулоцитах методом проточной цитометрии. Клиническая лабораторная диагностика. 2014;59(7):25-40.

16. Наумова ЕВ, Почтарь МЕ, Кисиличина ДГ, Плеханова ОС, Сипол АА, Бабенко ЕВ и др. Стандартизация диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии с помощью проточной цитометрии. Клиническая лабораторная диагностика. 2013;61(7):54-8.

17. Sipol AA, Babenko EV, Borisov VI, Naumova EV, Boyakova EV, Yakunin DI, et al. An inter-laboratory comparison of PNH clone detection by high-sensitivity flow cytometry in a Russian cohort. Hematology. 2015;20(1):31-8.

18. Weinstein S, Obuchowski NA, Lieber ML. Clinical evaluation of diagnostic tests. Am J Roentgenol. 2005;184(1):14-9.


Для цитирования:


Попов А.М., Кашпор С.А., Вержбицкая Т.Ю., Борисов В.И., Фечина Л.Г., Плясунова С.А., Масчан А.А., Новичкова Г.А. Определение FLAER-негативных гранулоцитов в периферической крови -простой скрининг-тест для диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2016;15(3):12-18. https://doi.org/10.24287/1726-1708-2016-15-3-12-18

For citation:


Popov A.M., Kashpor S.A., Verzhbitskaya T.Y., Borisov V.V., Fechina L.G., Plyasunova S.A., Maschan A.A., Novichkova G.A. FLAER-negative granulocytes detection in periferal blood is simple and highly reproducible test for pnh screening. Pediatric Hematology/Oncology and Immunopathology. 2016;15(3):12-18. (In Russ.) https://doi.org/10.24287/1726-1708-2016-15-3-12-18

Просмотров: 32


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1726-1708 (Print)
ISSN 2414-9314 (Online)